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免疫印迹封闭液

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商品类型:产品中心

上架时间:2022-05-28

产品描述:DuraBlot™系列 Western blot封闭液用于饱和封闭印迹膜,进而降低本底信号, 降低假阳性,提高检测灵敏度。蛋白印迹封闭试剂 说明书

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DuraBlot™系列 Western blot封闭液用于饱和封闭印迹膜,进而降低本底信号, 降低假阳性,提高检测灵敏度。


蛋白印迹封闭试剂        说明书

10%酪蛋白溶液,基于马来酸缓冲液,用于配制蛋白印迹封闭液以及—抗二抗稀释液。替代罗氏WESTBL-RO Roche, 货号11921673001。

蛋白质印迹实验和免疫荧光染色期间,作通用封闭液。该试剂用于膜封闭、膜洗涤和稀释检测抗体等步骤中。

具体使用工作溶液的配制:

Tris 缓冲液(TBS),pH 7.5 在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱(50mM)和 8.76g 氯化钠(150mM),并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8°C 下,TBS 可稳定储存 3 个月。

TBS-Tween(TBST) 洗涤缓冲液 1:将 1 ml Tween 20 溶于 1L TBS 中。在 2-8°C 下,TBST 可稳定储存 3 个月。 注意:0.1% Tween 20 适用于大多数应用,但具体取决于所用的膜和抗体 - 不同的表面活性剂(如SDS、Triton X-100 和 Nonidet P40),以及表面活性剂浓度在 0.01 至 1% 之间可以产生更好的结果。 

封闭液(1%) 使用 90ml TBS 稀释 10ml Western 封闭液(10x 浓缩液)。在 2-8°C 下,封闭液可储存 1 个月。 

封闭液(0.5%) 使用 50ml TBS 溶液稀释 50ml 封闭液(1%)。 

所有抗体的稀释液和孵育液是封闭液(0.5%)(用 TBS 溶液稀释)(见上文)。为了让检测效果达到最佳状态,我们建议在进行蛋白质印迹实验之前,先优化一抗和二抗的稀释浓度。(首先使用稀释 3 至 4 倍的一抗和恒定浓度的二抗。然后选择最合适的一抗稀释液,并以相同的方式优化二抗浓度。) 

注意:封闭液的浓度是改善蛋白质印迹信噪比的重要参数。如果优化了抗体浓度之后,背景仍然较高,则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度从 0.5% 增加至 1%。如果即便延长了抗体孵育时间,信号仍然较弱,则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度也从 0.5% 降低至 0.1%。


无蛋白封闭液        说明书

无蛋白封闭溶液,基于MOPS缓冲液,用于直接封闭印迹膜。


无蛋白快速封闭液        说明书

无蛋白快速封闭液,基于Tris缓冲液,作为印迹膜封闭工作液以及抗体稀释液使用。


5x酪蛋白封闭液 PBS        说明书

5倍酪蛋白溶液,稀释5倍使用;基于磷酸盐缓冲液。替代surmodics同款试剂。


5x酪蛋白封闭液 TRIS        说明书

5倍酪蛋白溶液,稀释5倍使用;基于Tris缓冲液。替代surmodics同款试剂。


10x酪蛋白封闭液 TRIS        说明书

10倍酪蛋白溶液,稀释10倍使用;基于Tris缓冲液。替代surmodics同款试剂。


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