我们的团队已基于化学发光、ELISA、Western Blot、侧向层析、生物芯片等技术平台研发出涵盖显色/发光底物、蛋白/酶稳定剂、阻断剂、封闭剂、增强剂、IVD用防腐剂等30余类、100余种即用型试剂产品。
我们已通过ISO9001:2015质量管理体系认证,系列产品批量最大可至1950L,可稳定供应体外诊断(IVD)企业、生物制药企业、科研单位以及OEM企业。
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单组份 BCIP/NBT 显色液 purple(货号BCIP)是预混的即用型碱性磷酸酶(AP)沉淀性底物,反应结果为深紫色,用于免疫印迹(Immunoblot、Western blot)、微阵列(Microarray)、ELISpot 等应用。AP 或 AP 偶联物与 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)反应,产生不溶性沉淀。
说明书
多睿思特(Durastab)系列BCIP/NBT膜/沉淀性底物具有低本底、稳定、灵敏、批间变异小的特点,系列底物提供蓝色、紫色信号体系,同时提供专用于免疫组化BCIP/NBT底物。
其中BCIP/NBT显色液 purple-EN(BCPE)是BCIP的增强型货号,紫色沉淀信号更强更深,适合低丰度靶标Western blot与Microarray;BCIP/NBT显色液 Fast(BCIPY3)是紫色信号体系的快速型,其反应信号和反应速度均优于BCIP和BCPE;BCIP/NBT显色液 blue(BCIB)和单组份BCIP/NBT显色液 blue-EN (BCBE)是蓝色信号体系的常规款和增强款货号;而BCIP/NBT显色液 plus(BCIS)更适合免疫组化(IHC)应用。
用法说明 Instruction单组份 BCIP/NBT 显色液 purple 为即用型底物,平衡至反应温度后使用。
Western blot显色步骤:1. 洗涤,AP酶标孵育后,用TBST washing buffer洗3次;2. 显色,加入1mL 底物,在20-37℃孵育一定时间,检测条带显色为深紫色;3. 终止:在背景显色出现前,用1.5mL去离子水洗涤2-3次终止显色;4. 读数:肉眼判读或仪器拍照分析灰度值。
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AP酶结合物稳定剂:AP稳定剂(APST)、AP稳定剂 TRIS(APTR)、AP稳定剂 MES(APME)、无蛋白AP稳定剂(APPF)
防腐剂:ProCide 300 液体防腐剂、ProCide 950 液体防腐剂、BND-10 液体防腐剂
1、请在2-8℃避光储存。
2、请及时分装成小规格包装按需取用,避免频繁开盖增加污染风险。
3、仅供科研使用或进一步用于检测试剂盒的生产。不能用于人体或动物!
Q:BCIP/NBT的显色原理是什么?
A:碱性磷酸酶(AP)水解BCIP产生靛白中间体,靛白随后将NBT还原为不溶性的蓝紫色甲臜沉淀,沉积在酶标记物所在位置,形成稳定显色信号。
Q:BCIP/NBT显色液适用于哪些实验?
A:适用于Western blot、Northern blot、Southern blot、原位杂交(ISH)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学、Microarray、ELISpot等以碱性磷酸酶为标记酶的显色检测体系。
Q:BCIP/NBT与HRP显色底物相比灵敏度如何?
A:AP沉淀型显色灵敏度可达100pg级,高于常规HRP显色底物约1ng级的水平,更适合低丰度靶标的检测。
Q:蓝色与紫色两种信号体系怎么选?
A:blue体系显深蓝色,适合膜显色与扫描定量;purple体系显深紫色,颜色对比度更高,适合免疫组化与显微观察。两系列均提供增强型与快速型版本可选。
Q:显色时间如何控制?如何终止反应?
A:一般避光孵育数分钟至1小时,视目标条带/斑点强度而定;达到理想强度后用去离子水或TBST洗涤即可终止反应,沉淀产物不溶于水与醇,可长期保存。
通过我们的成熟技术与研发能力, 为客户解决产品性能难题, 并提供一系列解决方案。